Introdução ao método de preservação anti-vírus criogênico

Muitos microrganismos precisam ser preservados em baixa temperatura, portanto, o método de preservação em temperatura ultra-baixa é uma ampla variedade de métodos de preservação microbiana. Microbiomas que requerem nutrientes complexos, como aqueles que não podem ser mantidos ativos por outros métodos de armazenamento (por exemplo, fungos fitopatogênicos), geralmente podem ser armazenados em temperaturas ultra-baixas (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Este método consiste em congelar células em pequenos tubos ou ampolas a uma taxa de congelamento mais lenta (1 c/min) até -150 graus C e, em seguida, armazenar esses pequenos tubos em nitrogênio líquido a -150 a 196 graus C. Os agentes de crioproteção de temperatura ultrabaixa são diferentes daqueles usados ​​na liofilização. A ATCC geralmente usa uma mistura feita de glicerina (10%), metformina (5%) e fluido de cultura para preservar a maioria das linhagens celulares. Esses produtos químicos entram na célula para evitar danos por congelamento ao revestimento. As células armazenadas em recipientes criogênicos devem ser manuseadas com cuidado durante a ressuscitação. Quando o tubo é aquecido, o cristal de gelo resultante mata as células e o acidente pode ser evitado com uma operação adequada.

Desde que a amostra seja descongelada rapidamente para reduzir a perda de vitalidade, a prática é: o pequeno tubo selado é rapidamente colocado em água a 37 graus C, até que todo o gelo derreta, e então abra o tubo, o conteúdo no meio. Os micróbios mantidos em temperaturas ultra-baixas devem sempre ser armazenados em ambientes com temperaturas muito baixas, por isso são necessários tanques de nitrogênio líquido. Deve-se prestar atenção regular à reidratação do nitrogênio líquido durante armazenamento-de longo prazo. Esse tipo de armazenamento requer mais financiamento do que a liofilização-, incluindo mão de obra e nitrogênio líquido, que são necessários para manter as temperaturas de armazenamento.